

Лигандсвязывающая активность рекомбинантного рецептора тетрациклиновых антибиотиков TetR по данным флуоресцентной спектроскопии
Аннотация
Методами флуоресцентной спектроскопии изучена лигандсвязывающая активность рекомбинантного рецептора TetR в отношении тетрациклина (Тс) и его аналогов (ТС). Добавление Тс к раствору функционально активного белка вызывало тушение триптофановой флуоресценции TetR на 80 % и многократно усиливало эмиссию Тс. Образовавшийся комплекс TetR-Тс проявлялся продуцированием полосы безызлучательного переноса энергии от возбужденного при 280 нм остатка триптофана к лиганду в области флуоресценции Тс с максимумом при 510 нм (FRET-эффект). Другие ТС (4-эпи-Тс и лимециклин) также связывались с TetR и проявляли свойства флуоресцентных зондов. Спектральные эффекты комплексообразования уменьшались или полностью исчезали в случаях частично или полностью денатурированного TetR в присутствии мочевины. Показано, что флуоресцентная спектроскопия может служить надежным инструментом оценки ТС-связывающей активности рекомбинантного TetR в ходе его получения, хранения и технологической обработки для практического применения в качестве ключевого компонента биоаналитических систем для определения тетрациклиновых антибиотиков в продуктах питания.
Об авторах
Т. С. СерченяБеларусь
Минск
В. С. Лапина
Беларусь
Минск
О. В. Свиридов
Беларусь
Минск
Список литературы
1. M. G. Bacanli. Arch. Toxic., 98 (2024) 1717—1725
2. M. M. J. Arsène, A. K. L. Davares, I. V. Podoprigora, L. A. Smolyakova, S. Souadkia, I. Khelifi, M. S. Das. Vet. World, 15, N 3 (2022) 662—671
3. И. С. Сазыкин, Л. Е. Хмелевцова, Е. Ю. Селиверстова, М. А. Сазыкина. Прикл. биохимия и микробиология, 57, № 1 (2021) 24—35
4. J. Filipek, K. Chalaskiewicz, A. Kosmider, M. Nielipinski, A. Michalak, M. Bednarkiewicz, M. Goslawski-Zeligowski, F. Prucnal, B. Sekula, A. J. Pietrzyk-Brzezinska. J. Struct. Biology, 216, N 2 (2024) 108071
5. S. E. Reichheld, Z. Yu, A. R. Davidson. Proc. Natl. Acad. Sci., 106, N 52 (2009) 22263—22268
6. W. Hinrichs, C. Fenske. Tetracyclines in Biology, Chemistry and Medicine, Birkhäuser, Basel (2001) 107—123
7. Y. Fan, J. Peng, J. Liu, J. Wang. Microchem. J., 199 (2024) 109931
8. V. K. Meyer, C. V Chatelle, W. Weber, R. Niessner, M. Seidel. Anal. Bioanal. Chem., 412, N 14 (2020) 3467—3476
9. S. Li, D. Chen, Z. Liu, S. Tao, T. Zhang, Y. Chen, L. Bao, J. Ma, Y. Huang, S. Xu, L. Wu, S. Chen. J. Hazard. Materials, 460 (2023) 132311
10. W. Q. Xia, J. Liu, J. P. Wang. Anal. Chim. Acta, 1276 (2023) 341609
11. G. Wang, W. Q. Xia, J. X. Liu, J. P. Wang, J. Liu. Microchem. J., 150 (2019) 104184
12. N. Moeller, E. Mueller-Seitz, O. Scholz, W. Hillen, A. A. Bergwerff, M. Petz. Eur. Food Res. Technol., 224, N 3 (2007) 285—292
13. О. В. Евдокимова, Е. В. Охремчук, А. А. Муратова, Л. Н. Валентович, К. И. Михайлопуло, И. И. Вашкевич, О. В. Свиридов. Сб. науч. тр. “Микробные биотехнологии: фундаментальные и прикладные аспекты”, Минск, Бел. навука (2023) 31—55
14. M. Takahashi, L. Altschmied, W. Hillen. J. Mol. Biol., 187, N 3 (1986) 341—348
15. S. E. Reichheld, A. R. Davidson. J. Mol. Biol., 361, N 2 (2006) 382—389
16. G. J. Palm, I. Buchholz, S. Werten, B. Girbardt, L. Berndt, M. Delcea, W. Hinrichs. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Proteins and Proteomics, 1868, N 6 (2020) 140404
17. Т. С. Серченя, И. И. Вашкевич, О. В. Свиридов. Докл. НАН Беларуси, 54, № 6 (2010) 62—67
18. Т. С. Серченя, О. В. Свиридов. Докл. НАН Беларуси, 57, № 3 (2013) 89—94
19. К. И. Михайлопуло, Т. С. Серченя, Е. П. Киселева, Ю. Г. Чернов, Т. М. Цветкова, Н. В. Ковганко, О. В. Свиридов. Журн. прикл. спектр., 75, № 6 (2008) 859—866 [K. I. Mikhailopulo, T. S. Serchenya, E. P. Kiseleva, Yu. G. Chernov, T. M. Tsvetkova, N. V. Kovganko, O. V. Sviridov. J. Appl. Spectrosc., 75, N 6 (2008) 857—863]
20. G. Wang, H. C. Zhang, J. Liu, J. P. Wang. Anal. Biochem., 564-565 (2019) 40—46
21. W. Q. Xia, P. L. Cui. Microchem. J., 170, N 4 (2021) 106779
22. Д. А. Семенов, Т. П. Северинчик, О. С. Куприенко. Тез. докл. XХ междунар. науч. конф. “Молодежь в науке”, 20—22 сентября 2023 г., Минск, Бел. навука (2023) 776—778
23. J. R. Lakowicz. Principles of Fluorescence Spectroscopy, 2nd ed., New York, Kluwer Academic-Plenum Publ. (1999)
24. M. De Weert, L. Stella. J. Mol. Struct., 998, N 1-3 (2011) 144—150
25. M. De Weert, C. Schönbeck. Eur. J. Pharm. Sci., 203 (2024) 106930
26. E. R. Mojica, E. Nguyen, M. Rozov, F. V. Bright. J. Fluoresc., 24, N 4 (2014) 1183—1198
27. M. D. A. Dantas, H. A. Tenorio, T. I. B. Lopes, H. J. V. Pereira, A. J. Marsaioli, I. M. Figueiredo, J. C. C. Santos. Int. J. Biol. Macromol., 102 (2017) 505—514
28. M. Mukherjee, P. S. Sardar, S. Kr. Ghorai, S. K. Samanta, A. S. Roy, S. Dasgupta, S. Ghosh. PLOS One, 8, N 4 (2013) e6094
29. M. Takahashi, J. Degenkolb, W. Hillen. Anal. Biochem., 199, N 2 (1991) 197—202
30. T. Lederer, M. Kintrup, M. Takahashi, P. E. Sum, G. A. Ellestad, W. Hillen. Biochemistry, 35, N 23 (1996) 7439—7446
31. W. Xia, J. Liu, J. Wang. Foods, 11, N 23 (2022) 3850
32. A. G. Stephen, A. Kumar. Int. J. Mol. Sci., 25, N 3 (2024) 1764
Рецензия
Для цитирования:
Серченя Т.С., Лапина В.С., Свиридов О.В. Лигандсвязывающая активность рекомбинантного рецептора тетрациклиновых антибиотиков TetR по данным флуоресцентной спектроскопии. Журнал прикладной спектроскопии. 2025;92(5):603-611.
For citation:
Serchenya T.S., Lapina V.S., Sviridov O.V. Ligand-Binding Activity of Recombinant Tetracycline Antibiotics Receptor TetR as Determined by Fluorescence Spectroscopy. Zhurnal Prikladnoii Spektroskopii. 2025;92(5):603-611. (In Russ.)